Cara melakukan pengenceran serial

Isi

• tahap
• Metode 1 Lakukan pengenceran sederhana
• Metode 2 Hitung faktor pengenceran dan konsentrasi akhir

Dalam kimia, pengenceran terdiri dari pengurangan konsentrasi larutan yang diberikan. Pengenceran serial hanyalah pengenceran berulang dari solusi asli untuk memperkuat faktor pengenceran secara cepat. Jenis pengenceran ini sering dilakukan selama percobaan yang membutuhkan larutan yang sangat encer dan akurasi yang tinggi, seperti yang melibatkan kurva konsentrasi pada skala log atau yang memungkinkan kepadatan bakteri dalam media tertentu dihitung. Mereka sangat sering dilakukan dalam biokimia, mikrobiologi, farmakologi atau kimia.

tahap

Metode 1 Lakukan pengenceran sederhana

1. 
   

   
   Tentukan cairan encer yang tepat (atau pengencer). Pilihan pengencer sangat penting dan tergantung pada solusi yang ingin Anda encerkan. Pengencer sering berupa air suling, tetapi tidak sistematis. Jadi, dengan larutan yang mengandung bakteri atau sel, media kultur digunakan sebagai gantinya. Untuk pengenceran serial, pengencer yang sama digunakan di semua tabung.
   • Jika Anda tidak yakin pengencer mana yang harus digunakan, dapatkan bantuan dari orang yang kompeten atau lihat di Internet untuk mengetahui apa yang harus dilakukan orang untuk pengalaman serupa.

2. 
   

   
   Siapkan beberapa tabung reaksi yang mengandung 9 ml cairan pengenceran. Tabung reaksi ini akan digunakan untuk membuat pengenceran berturut-turut. Prinsipnya sederhana, Anda akan mengambil sampel dari solusi awal dan mentransfernya ke tabung berikutnya, kemudian mengambil sampel tabung ini untuk meletakkannya di yang berikutnya, dll.
   • Sebelum memulai pengenceran, disarankan untuk mengidentifikasi terlebih dahulu tabung reaksi untuk menghindari kebingungan nantinya.
   • Dalam setiap tabung, Anda akan memiliki konsentrasi sepuluh lebih rendah daripada yang sebelumnya. Tabung pertama akan berisi larutan encer dalam kesepuluh, kedua, keseratus, ketiga, keseribu, dan seterusnya. Tentukan terlebih dahulu jumlah pengenceran untuk menghindari membuat lebih banyak tabung dari yang diperlukan dan pengencer limbah tidak perlu.

3. 
   

   
   
   
   Siapkan tabung reaksi dengan larutan ibu Anda. Taruh minimal 2 ml. Jumlah minimum solusi stok untuk pengenceran serial adalah satu mililiter. Biarkan 2 ml untuk kemungkinan pengenceran kedua. Tabung larutan ibu ini, Anda dapat menandainya sebagai "SM".
   • Sebelum memulai pengenceran serial, campur larutan awal dengan baik.

4. 
   

   
   Lakukan pengenceran pertama. Pipet 1 ml larutan stok ke dalam tabung reaksi berlabel "SM" dan pindahkan jumlah ini ke tabung reaksi berlabel. 1/10 yang sudah mengandung 9 ml cairan pengenceran. Campur untuk mendapatkan solusi yang homogen. Dalam tabung ini, sekarang ada 10 ml larutan: 1 ml larutan stok dan 9 ml cairan pengenceran. Solusi baru ini sepuluh kali lebih sedikit terkonsentrasi daripada yang sebelumnya.

5. 
   

   
   
   
   Lakukan pengenceran kedua. Dalam pengenceran seri kedua, Anda akan menggambar 1 ml larutan tabung berlabel 1/10 dan Anda akan menuangkannya ke dalam tabung 1/100 yang sudah mengandung 9 ml cairan pengenceran. Tabung itu 1/10 akan tercampur dengan baik sebelum pengambilan sampel. Setelah transfer selesai, campur tabung dengan baik 1/100. Solusi dari tabung yang ditandai 1/10 adalah 10 kali lebih terkonsentrasi daripada tabung berlabel 1/100.

6. 
   

   
   Ulangi manipulasi ini jika perlu. Prosedur ini dapat diulang sebanyak yang diinginkan hingga pengenceran yang diinginkan tercapai. Untuk percobaan yang melibatkan kurva konsentrasi, Anda dapat memperoleh serangkaian solusi dengan pengenceran ke unit, kesepuluh (1/10), keseratus (1/100) atau keseribu (1/1000).

Metode 2 Hitung faktor pengenceran dan konsentrasi akhir

1. 
   

   
   Hitung perbandingan pengenceran akhir setelah pengenceran serial. Rasio total pengenceran diperoleh dengan mengalikan faktor pengenceran dengan sendirinya sebanyak ada pengenceran. Secara matematis, rumusnya adalah sebagai berikut: D_t = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_ndengan D_t mewakili faktor pengenceran total dan D_n, rasio pengenceran.
   • Jadi, mari kita asumsikan bahwa Anda melakukan pengenceran 1/10 cairan 4 kali berturut-turut. Dalam rumus, ganti faktor pengenceran dengan nilainya: D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
   • Faktor pengenceran terakhir dari tabung keempat dalam pengenceran serial Anda adalah 1/10 000. Konsentrasi larutan tabung terakhir sekarang 10.000 kali lebih rendah daripada larutan asli.

2. 
   

   
   Tentukan konsentrasi larutan setelah pengenceran. Untuk menemukan konsentrasi akhir larutan setelah pengenceran serial, Anda perlu mengetahui konsentrasi awal. Maka rumusnya adalah: C_terakhir = C_awal/ Adengan C_terakhir mewakili konsentrasi terminal dari larutan encer, C_awal, konsentrasi larutan stok dan D, rasio pengenceran ditentukan terlebih dahulu.
   • Jadi, jika Anda mengencerkan larutan sel dengan konsentrasi 1.000.000 sel per ml dan rasio pengenceran Anda ditetapkan menjadi 1.000, apa yang akan menjadi konsentrasi akhir dari sampel yang diencerkan Anda?
   • Gunakan rumus:
     • C_terakhir = C_awal/ A
     • C_terakhir = 1 000 000/1 000
     • C_terakhir = 1000 sel / ml

3. 
   

   
   Perhatikan unit yang digunakan. Saat melakukan perhitungan, selalu periksa apakah Anda menggunakan unit yang sama. Jadi, jika Anda mulai dari konsentrasi sel per ml, hasil akhir Anda juga akan berada dalam sel per ml. Jika konsentrasi awal Anda adalah dalam bagian per juta (ppm), konsentrasi akhir Anda akan berada dalam bagian per juta.